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細胞培養(yǎng)常遇問題集錦(十七)
發(fā)布時間: 2021-12-23 點擊次數: 1246次細胞培養(yǎng)問題集錦第十七期,小編會繼續(xù)收集相關問題,每期都為大家更新5個細胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~
81、
▲問:hepg2細胞有很多小球聚集到一起,這是污染還是沒有吹開的細胞?是不是念珠菌感染?出不來形態(tài),吹不勻。
答:肝癌就是這樣,很容易坨,肝癌會有一個聚集成團,一片一片的clone,也會成聚集,推薦是帶丙酮酸鈉的MEM。
82、
問:細胞培養(yǎng)中加入biotin有什么作用呢?
答:是為了促進細胞增殖。
83、
▲問:細胞轉了敲低基因的病毒之后,為什么總會出現一些比細胞還要亮的,碎片樣的東西,或者圓形的東西呢?
答:基因的表達包括 GFP用,都會用泊松分布Poisson distribution的形式出現, 有些細胞有多一點GFP的表達, 有些少的。圓形的細胞是因為基因蛋白表達較高 ,所以熒光蛋白表達都高。
▲問:這種很亮的碎片呢?感覺他不像是細胞的樣子!
答:細胞開始細胞凋亡,可能是凋亡小體,可用DAPI。
84、
問:細胞剛復蘇都是亮亮的圓點是什么原因?之前復蘇長得很快。
答:是不是還沒貼壁?
問:之前兩天都長滿貼壁了,這次也兩天了只有一點細胞貼壁。
答:復蘇率不高,是不是沒凍好?
問:之前別人凍的,需要重新復蘇嗎?
答:如果培養(yǎng)基和血清養(yǎng)別的沒問題,那不太可能是營養(yǎng)體系問題??赡苁莾龃姝h(huán)節(jié)出現問題,傳代后不會有好轉,看看細胞能增殖出來不,增殖不出來就需要重新復蘇了。
85、
▲問:請問上面三個圖里,細胞是染菌了嗎?昨天給單獨加了100ul過濾的bi血清。
答:從照片上看黑點的形態(tài)高倍數放大是球菌,低倍數放大它們是立體聚集在一起,疑似是葡萄球菌。平面聚集的是鏈球菌。
問:黑點是不會動的,用三抗可以嗎,還有救嗎?
答:細胞還有庫存的話建議重新復蘇,因為細胞感染了,去除要花多些時間。
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